利用M-RAPD技术绘制不同病原微生物基因指纹图

• 作者: 刘刚 翟朝阳 陶传敏
• 来源期刊: 四川大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 多重随机引物PCR方法 病原微生物 基因指纹图
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 563-567
• 页数: 5页
• 分类号: R378
• 字数: 5022字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2004.04.033

摘要

目的探讨一种多重随机引物PCR方法(M-RAPD)对不同种株病原微生物进行鉴定的可能性.方法将10个碱基的随机引物进行随机组合,利用三条组合的随机引物在较高的退火温度下对不同种株病原微生物染色体DNA进行扩增,通过15 g/L琼脂糖凝胶电泳获得不同种株病原微生物的扩增图谱,并用软件Gelworks 1d Intermediate进行分析.结果初步实验表明, M-RAPD技术可以得到稳定的种株特异的DNA指纹图谱,其条带清晰、数目较多、片段大小分布均匀.三引物的扩增产物包含了其中任意两引物的绝大多数扩增产物,大、小片段均可出现增减,但小片段更易增加;对同一种病原微生物三引物所提供的基因信息要远多于两引物所提供的信息,增加的信息量约为原来的50%;不同耐药菌株间及其与相应标准株间差异亦很明显,但同种不同株间相同的扩增产物要多于不同的扩增产物.软件Gelworks 1d Intermediate的分析数据亦支持我们的实验结果.结论 M-RAPD技术对不同种株病原微生物染色体DNA扩增时,能获取较丰富的遗传信息,可迅速、简便地鉴定不同种株的病原微生物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘刚	四川大学基础医学与法医学院生物化学与分子生物学实验室	44	335	10.0	16.0
2	翟朝阳	四川大学基础医学与法医学院生物化学与分子生物学实验室	19	188	7.0	13.0
3	陶传敏	四川大学华西医院实验医学科临床微生物室	77	494	12.0	18.0