内质网滞留型抗Ⅳ型胶原酶胞内抗体对肿瘤细胞侵袭和增殖的抑制作用

• 作者: 张胜华 李毅 沈恩允 王维刚 甄永苏
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: Ⅳ型胶原酶 胞内抗体 肿瘤侵袭 增殖 基因治疗
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1005-1010
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|R735.7
• 字数: 4870字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2004.09.006

摘要

背景与目的:侵袭转移是恶性肿瘤细胞的重要特性,Ⅳ型胶原酶(包括基质金属蛋白酶 2和基质金属蛋白酶 9)在恶性肿瘤转移扩散中发挥着极其重要的作用.我们通过胞内抗体技术,阻断Ⅳ型胶原酶的分泌,以期达到抑制恶性肿瘤细胞侵袭转移的效果.方法:构建编码可在内质网滞留的抗Ⅳ型胶原酶单链抗体的表达载体 pcDNA3.1 ER.scFv,并转染入人巨细胞肺癌 PG细胞系内. Western blot 检测 pcDNA3.1 ER.scFv的表达,免疫共沉淀实验分析胞内抗体 ER.scFv在 PG细胞内与靶蛋白相互作用情况,明胶酶谱检测Ⅳ型胶原酶的分泌,以及体外侵袭和增殖实验.结果: ER.scFv在 PG细胞内表达,而且能够识别和结合靶蛋白基质金属蛋白酶 9.通过胞内抗体的基因转染,显著抑制了Ⅳ型胶原酶的功能和活性. ER.scFv转染的 PG细胞较野生型和空白质粒组,侵袭能力明显降低,抑制率为 76.3%( P< 0.05),在 Matrigel上进行细胞培养, ER.scFv对 PG细胞有明显的抗增殖效果.结论:内质网滞留型胞内抗体技术可以在蛋白加工、分泌这一关键通路中抑制肿瘤细胞Ⅳ型胶原酶的活性,进而抑制了肿瘤侵袭和增殖,在肿瘤基因治疗中具有应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	甄永苏		17	201	7.0	14.0
2	沈恩允		1	4	1.0	1.0
3	王维刚		1	4	1.0	1.0
4	李毅		2	8	2.0	2.0
5	张胜华		4	100	3.0	4.0