人vWF-A1区蛋白的表达及其对血小板聚集的抑制作用

• 作者: 季顺东 张威 朱明清 王迎春 白霞 祝怀平 邵波静 阮长耿
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血栓形成 血小板 von Willebrand因子
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: R363
• 字数: 2833字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2004.01.010

摘要

目的:进一步研究血栓形成的机制,开发抗血栓药物.方法: 应用基因重组技术在大肠杆菌中表达人vWF-A1区蛋白,经过纯化、复性,获得重组蛋白(rvWF-A1),同时用流式细胞术检测rvWF-A1与血小板膜糖蛋白血小板膜糖蛋白(glycoprotein, GP)Ib的结合能力,应用血小板聚集仪测定rvWF-A1对瑞斯托霉素(ristocetin)诱导的血小板聚集抑制作用.结果: 重组表达载体pQE-31-vWF-A1在大肠杆菌M15中得到高效表达,表达的重组蛋白量占菌体总蛋白的30%,Ni-NTA agrose柱纯化后,其纯度为95%,经复性的rvWF-A1蛋白具有良好的生物学活性.它可与血小板模糖蛋白血小板膜糖蛋白GPIb结合,阳性率为78.6%;它可以抑制ristocetin诱导的血小板聚集,抑制率为84.7%.结论: 在原核细胞中可以成功地高效表达人vWF-A1区蛋白,该重组蛋白有可能开发为有效的抗血栓药物.