反义及显性负调节 AKT2 RNA对脑胶质瘤细胞增殖抑制作用的体外研究

• 作者: 康春生 李捷 浦佩玉 王广秀
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 胶质瘤 AKT2 反义及显性负调节 AKT2 转染 增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1267-1272
• 页数: 6页
• 分类号: R651
• 字数: 4795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2004.11.007

摘要

背景与目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)下游的丝苏氨酸激酶2(serine/threoninE-kinase-2,AKT2)信号转导通路对肿瘤细胞的生存和凋亡具有十分重要的作用.本文研究了反义AKT2(antisensE-AKT2,AS-AKT2)和显性负调节AKT2(dominant negative AKT2,DN-AKT2)构建体对人脑胶质瘤细胞系TJ905的增殖和凋亡的调控作用.方法:脂质体介导AKT2构建体转染人脑胶质瘤细胞系TJ905,原位杂交和蛋白印迹法检查AKT2的表达水平,Ki-67标记指数和 MTT法检测细胞增殖能力,TUNEL法计算凋亡指数评价肿瘤细胞凋亡的变化.结果:对每种 AKT2构建体转染后随机选择3个扩增后进一步分析.原位杂交和蛋白印迹结果表明,转染AS-AKT2后AKT2表达显著抑制,转染DN-AKT2后AKT2表达无明显变化.MTT研究发现:AS-AKT2组和DN-AKT2组的6天细胞生存率分别为(49.30～ 51.46)％和(50.52～55.23)％,细胞存活率显著低于对照组和空载体组( P<0.001);AS-AKT2组和DN-AKT2组的标记指数(Ki-67 labeling index,Ki- 67 LI)分别为(57.50～59.33)％和(59.17～61.00)％,明显低于对照组(76.50％)和空载体组(74.83％)(P<0.001);TUNEL法凋亡分析表明:对照组和空载体组几乎没有凋亡细胞,AS-AKT2组(8.33％～8.83％)和DN-AKT2组( 7.50％～7.83％)的凋亡指数显著增加(P<0.001).结论:AKT2通路可以对胶质瘤细胞的增殖和凋亡发挥重要的调控作用.