重组人血管内皮细胞生长因子的表达及活性研究

• 作者: 吉琼梅 吴朝霞 王晓华 董文心
• 来源期刊: 暨南大学学报(自然科学与医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 人血管内皮生长因子 鸡胚绒毛尿囊膜 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 426-430
• 页数: 5页
• 分类号: R322.1|Q51
• 字数: 3141字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2004.04.006

摘要

目的:用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达人血管内皮生长因子(VEGF),分离纯化并检测其生物学活性,以研究其在药学领域潜在的药用价值.方法:利用PCR技术扩增VEGF基因片段,克隆到pQE30表达载体中,转化E.coli M15菌株后用IPTG进行诱导表达.经裂解细胞、变性、复性和Ni-NTA agarose金属螯合柱层析等方法纯化得到VEGF.用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)血管生成实验检测VEGF的生物活性.结果:重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了相对分子质量为20 600的融合蛋白,它以不溶性的包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30%左右.经分离纯化融合蛋白SDS-PAGE显示为单一区带.CAM结果表明给药组血管生成数(21.7±3.1、39.3±2.8) 与对照组(15.4±1.9、29.2±4.2)相比有明显增加(P<0.05).结论:利用原核表达系统得到血管内皮生长因子具有天然VEGF生物学活性,为进一步的应用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王晓华	广州医学院生物化学与分子生物学教研室	24	130	7.0	10.0
2	吉琼梅	广州医学院生物化学与分子生物学教研室	6	23	3.0	4.0
3	董文心	上海医药工业研究院药理研究室	28	199	7.0	14.0
4	吴朝霞	广州医学院生物化学与分子生物学教研室	3	20	2.0	3.0