用改进的重叠区扩增基因拼接法构建中间缺失突变体

• 作者: 夏家辉 夏昆 房海燕 李成华 邓小云 郑多
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 重叠区扩增基因拼接法 中间缺失突变体 克隆
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 52-55
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3000字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2004.01.013

摘要

目的构建缺失第325～373位氨基酸密码子的磷脂酸磷酸化激酶β(phosphatidylinositol 4-kinase beta,PI4K-β)基因,以探索一种简便的构建中间缺失突变体的方法. 方法应用重叠区扩增基因拼接法的原理,在拼接延伸后,再进行一次PCR扩增,得到缺失第325～373位氨基酸密码子的PI4K-β基因,克隆至pCMV-Tag4A真核表达载体. 结果成功地构建出缺失第325～373位氨基酸密码子的PI4K-β突变体. 结论这种改进的重叠区扩增基因拼接法可以有效而可靠地构建中间缺失突变体, 具有推广价值.