通过PCR进行长片段DNA的合成

• 作者: 李炜东 梁布锋 祁自柏
• 来源期刊: 遗传
• 学科: 生物学
• 关键词: PCR DNA合成 长片段
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 349-352
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3262字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-9772.2004.03.015

摘要

利用PCR合成DNA长片段(Synthesis Large Frament DNA using PCR,SLFD PCR)是一种有效的合成长片段DNA的方法.采用一段已知的500～600bp碱基的DNA片段为PCR模板,根据所要合成的DNA序列可以设计一系列的PCR引物,这些引物都位于模板DNA的5'端,长度为50～60bp,且从5'到3'方向顺序重叠,重叠碱基数目为12～15,全部引物叠加所得到的DNA正是自己所要合成的DNA.这组引物中最3'端的一条含有一个BamH I酶切位点,在该位点后面有15碱基与模板DNA5'端一致的序列.另外还设计一条与该模板匹配的下游引物,引物内也含有一个BamH I酶切位点.首先采用5'端最右侧的引物与下游引物进行PCR,在PCR进行10个循环后,以此次PCR的产物为下一轮PCR的模板,该轮PCR采用右侧倒数第二个引物为上游引物,下游引物保持不变.采用类似的方法,完成所有的PCR循环,就可以得到所需要合成的DNA长片段.该方法尤其适合100～200碱基左右的长片段DNA的快速合成与克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁布锋	中国科学院武汉病毒研究所	15	49	5.0	6.0
2	李炜东	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0
3	祁自柏	中国科学院武汉病毒研究所	1	0	0.0	0.0