人可溶性白介素-4受体(sIL-4R)在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 张勇 李元 王渭池
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人可溶性白介素-4受体 pBV220 表达与纯化
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 778-784
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 5846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7626.2004.06.013

摘要

白细胞介素-4(IL-4)作为一种多功能的细胞因子在哮喘等变态性炎症反应中具有关键作用.IL-4通过结合细胞表面的白介素-4受体(IL-4R)发挥其生物学效应.sIL-4R缺少跨膜和胞内结构域,结合IL-4后不能产生信号传递介导IL-4的生物学活性,但sIL-4R与IL-4结合的高度特异性和极高的亲和力使它非常适合作为理想的IL-4拮抗剂,应用于哮喘等疾病治疗.采用RT-PCR方法,以人单核细胞总RNA为模板扩增得到编码sIL-4R的基因片段,经测序确证后插入大肠杆菌高效表达质粒pBV220,得到重组质粒pBV220/sIL-4R,重组质粒转化E.coli DH5α.重组菌经温度诱导后超声破碎得到包涵体,经Superdex HR75分子筛柱和DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱进行纯化,HPLC检测表明纯度达到90%.N端测序证明,重组sIL-4R与天然sIL-4R N端序列完全一致.Western印迹、配基结合印迹对重组sIL-4R进行鉴定.结果表明,重组sIL-4R具有结合IL-4的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李元	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术所	25	115	6.0	9.0
2	张勇	中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术所	9	38	3.0	6.0
3	王渭池	中国科学院物理所软物质物理实验室	5	18	3.0	4.0