神经生长抑制因子相互作用蛋白的分子克隆、鉴定及其生物学特性

• 作者: 任宏伟 康巧华 王宗元 茹炳根 陈巧林
• 来源期刊: 遗传学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 生长抑制因子 Alzheimer's症 酵母双杂交系统 dUTPase 基因表达 嗜铬细胞瘤株
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 人类与医学遗传学
• 页码范围: 7-12
• 页数: 6页
• 分类号: Q74
• 字数: 4770字
• 语种: 中文

摘要

为了探讨神经生长抑制因子(Neuronal growth inhibitory factor,GIF)与Alzheimer's病(Alzheimer's disease,AD)的关系,将GIF的cDNA全基因克隆到载体pHyblex中,运用酵母双杂交系统从Alzheimer's病人脑cDNA文库中筛选出与GIF相互作用蛋白的cDNA克隆.免疫共沉淀和蛋白质印迹实验进一步验证了该蛋白在体内与GIF相互作用的特异性.克隆并鉴定了其中1个与GIF特异性结合的蛋白,与人细胞核dUTP焦磷酸酶(DUT)同源.进一步构建了重组表达质粒pGEX-4T-1/DUT,转化大肠杆菌BL21,经谷胱甘肽-Sepharose 4B亲和层析、凝血酶酶切和Sephacryl S100纯化,得到纯度95%以上的dUTPase蛋白.体外生物学活性检测表明,表达的dUTPase蛋白可以与GIF共同作用嗜铬细胞瘤株(pheochromocytoma)PC12,对细胞的生长产生抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宗元	扬州大学畜牧兽医学院	31	402	12.0	19.0