限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究

• 作者: 孙朝晖 张宝 彭翼飞 郑文岭 马文丽
• 来源期刊: 肝脏
• 关键词: 丙型肝炎病毒 限制性显示 基因芯片 分子探针
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-17
• 页数: 3页
• 字数: 2383字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-1704.2004.01.006

摘要

目的探讨限制性显示(restriction display,RD)技术在制备丙型肝炎病毒(HCV)分型芯片探针的可行性.方法用限制性内切酶Sau3A I消化HCV1a、1b、2a亚型全长cDNA,所得的限制性内切酶片段与通用接头相连,通过10个选择性引物进行分组PCR,使得各片段得以扩增并分布于10个亚组中,经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离.切胶回收后作3次PCR,得到较纯净的HCV cDNA限制性片段.对这些片段做分子克隆,并测序鉴定.结果由HCV 3个亚型1a、2a、1b的全长cDNA得到66个大小相对均一(200～900bp)的限制性片段,平均每个亚型约22个.测序结果表明,属于HCV基因,可以作为HCV分型芯片的探针.结论RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段,适合于分型诊断基因芯片探针的收集.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马文丽	第一军医大学分子生物学研究所	136	1135	16.0	27.0
2	张宝	第一军医大学分子生物学研究所	40	211	9.0	11.0
3	郑文岭	广州军区广州总医院肿瘤分子生物学研究所	200	1451	18.0	26.0
4	孙朝晖	广州军区广州总医院肿瘤分子生物学研究所	99	504	11.0	18.0
5	彭翼飞	第一军医大学分子生物学研究所	8	27	3.0	5.0