重组α-半乳糖苷酶的制备工艺研究

• 作者: 宫锋 徐华 徐莉娟 李立立 李素波 王颖丽 田曙光 章扬培 高新 高红伟 鲍国强
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 工学
• 关键词: 发酵 基因重组α-半乳糖苷酶 毕赤酵母 纯化 血型改造
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 566-569
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|Q503|TQ92
• 字数: 3878字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2004.06.007

摘要

α-半乳糖苷酶是B→O血型改造研究中的关键工具酶.在获得了可分泌表达α-半乳糖苷酶的基因工程毕赤酵母菌株的基础上,进行了工程菌株在5 L发酵罐中的发酵.发酵液上清中α--半乳糖苷酶活性为80～150 U/mL,蛋白浓度为3～4.5 mg/mL,比活性约为20～30 U/mg.发酵液采用超滤、阳离子交换层析、疏水层析和阴离子交换层析等纯化方法,建立起了规模化生产重组α-半乳糖苷酶的工艺.制备的重组酶纯度经鉴定达98%以上,符合新生物制品的纯度要求.制备的重组α-半乳糖苷酶可有效地将B型红细胞改造成O型红细胞,从而解决了应用此酶开展B→O血型改造研究的关键问题.