抗人趋化素样因子1羧基端多肽抗体的制备、鉴定及组织芯片分析

• 作者: 刘雅楠 宋泉声 张颖妹 朱晓辉 杨田 甘启霓 石爽 邱晓彦 韩文玲 马大龙
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 趋化素样因子1 抗多肽抗体 组织芯片
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 496-499
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

目的制备及鉴定抗人趋化素样因子1(CKLF1)多克隆抗体,为CKLF1表达和功能研究提供基础.方法利用生物信息学方法分析CKLF1蛋白序列,设计、合成CKLF1羧基端多肽,与钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,免疫新西兰白兔获得多克隆抗体.经ELISA法测定抗体效价,Western-blot鉴定抗体与原核细胞体外翻译和果蝇S2细胞稳定转染表达的CKLF1反应,组织芯片检测该抗体与内源性表达的CKLFs结合.结果抗CKLF1 C端多肽抗体的效价为10-4,能识别在原核细胞体外翻译系统和真核细胞中表达的CKLF1蛋白,也可与多种组织中天然表达的CKLFs发生特异性反应,在正常支气管软骨、胃粘膜和平滑肌中呈阳性表达,在正常直肠和高分化直肠癌的腺上皮中呈强阳性表达,而在低分化的直肠癌中为阴性.结论抗CKLF1多克隆抗体效价高,亲和力强,可用于CKLF1的检测和研究.