IL-18-PE38重组免疫毒素的原核表达及其鉴定

• 作者: 吕梅励 张林 李明远 李虹 蒋忠华
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: IL-18 绿脓杆菌外毒素 重组免疫毒素 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 753-756
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2004.06.002

摘要

目的构建绿脓杆菌外毒素PE38融合鼠IL-18基因的原核表达载体并鉴定其表达.方法首先采用RT-PCR获得小鼠IL-18基因,再通过适当的酶切及连接反应,构建小鼠IL-18与PE38融合基因的原核表达载体PRKL-IL18-PE38,重组载体经限制性内切酶、PCR及DNA序列测定等证实连接片段的正确性后,再转染感受态大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达,表达产物用SDS-PAGE和蛋白免疫印迹法分别测定其相对分子质量及特异性.结果酶切分析、PCR鉴定和DNA测序等证实,IL-18-PE38免疫毒素的原核表达载体被成功构建,重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达,表达产物的相对分子质量与预期值一致,且所表达蛋白可被抗IL-18的特异性抗体所识别.结论IL-18-PE38融合基因原核表达载体的获得,为进一步研究其对Th1细胞的靶向细胞毒性及临床应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李虹	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	241	1196	15.0	20.0
2	李明远	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	80	362	11.0	14.0
3	张林	四川大学华西医院教育部人类疾病生物治疗重点实验室	237	1697	19.0	30.0
4	蒋忠华	四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室	18	52	4.0	6.0
5	吕梅励	四川大学华西医院教育部人类疾病生物治疗重点实验室	12	78	5.0	8.0