用禽巴氏杆菌C48-1(5:A)禽大肠杆菌O78的原生质体融合二联弱毒株F4的37℃24 h马丁肉汤培养物,以3.45×109~6.90×1010CFU/只的4种不同剂量,分别肌肉注射接种5~40日龄粤黄鸡共216只,观察14 d,结果表明F4株对20日龄以上的鸡安全性达100%.F4株的培养物肌注鸡体后4 h从肝脏分离,如此连续通过粤黄鸡10代的试验表明,F4株的毒力是稳定的.以F4株的培养物3.45×109CFU/只肌注免疫200只20日龄粤黄鸡,免疫后第14天起每隔2周、直至第12周分别以C48-1、O78标准强毒菌的3×LD50剂量攻击;同时分别制备O78菌的超声粉碎抗原、菌体抗原、荚膜多糖抗原,C48-1菌的超声粉碎抗原、热稳定抗原、荚膜多糖抗原,建立检测血清中抗O 78、C48-1的ELISA方法;免疫后每隔1周分别检测免疫鸡血清中的O78、C48-1IgG效价,直至免疫后84 d.结果表明:F4株免疫后对O78的免疫保护率为14 d 50%、28 d 70%、42 d 65%、56 d 50%、84 d 35%,对C48-1的免疫保护率为14 d 25%、28 d40%、42 d 75%、56 d 50%、84 d 30%.免疫鸡血清中抗O78、抗C48-1的IgG消长曲线均与免疫保护曲线相一致.