大鼠周围神经43kDa蛋白的生化初步分析

• 作者: 丁斐 姚登兵 王云丹 顾晓松
• 来源期刊: 中国临床解剖学杂志
• 关键词: 损伤坐骨神经 43kDa蛋白 亲和层析 MALDI-TOF-MS 大鼠
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 282-285
• 页数: 4页
• 分类号: Q51
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-165X.2004.03.019

摘要

目的:提取大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的43kDa蛋白(PNP-43),并对PNP-43进行生化初步分析.方法:纯化抗PNP-43单克隆抗体,将纯化的抗PNP-43单克隆抗体与CNBr-activatedSepharose 4B交联,用亲和层析的方法,提取PNP-43,并将提取的PNP-43进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和等电聚焦凝胶电泳(IEF)分析,考马斯亮蓝染色,取SDS-PAGE后染色的43kDa蛋白区带胶条,进行基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱检测(MALDI-TOF-MS),测定肽质量指纹图谱,在相应的蛋白质谱数据库(MS-Fit)中检索.结果:(1)、经层析系统紫外检测,亲和层析后洗脱,在280nm波长处显示一个的紫外吸收峰.(2)、亲和层析获得的蛋白,经SDS-PAGE分析,在43.0kDa标准蛋白位置出现单一蛋白条带.(3)、经IEF分析,PNP-43的等电点(pI)为5.8.(4)、经MALDI-TOF-MS检测,测定肽质量指纹图谱,通过MS-Fit检索未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据.结论:用亲和层析的方法,获得了大鼠损伤坐骨神经组织中表达增强的PNP-43,通过质谱分析和MS-Fit检索提示未发现有与该蛋白完全相同的质谱数据.为进一步深入研究PNP-43的结构与功能提供了科学依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丁斐	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	50	329	10.0	15.0
2	顾晓松	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	58	406	11.0	18.0
3	姚登兵	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	9	53	4.0	7.0
4	王云丹	南通医学院江苏省神经再生重点实验室	2	0	0.0	0.0