华支睾吸虫RPEF基因的克隆与序列分析

• 作者: 余新炳 吴德 吴忠道 张咏莉 毕惠祥
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 华支睾吸虫 RPEF基因 PET重组质粒
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: R383.22
• 字数: 3273字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2004.01.003

摘要

目的构建华支睾吸虫成虫RNA聚合酶Ⅱ延长因子(RPEF)基因PET重组质粒,分析其编码序列.方法根据RPEF基因已知序列设计一对引物,用PCR技术从华支睾吸虫质粒文库模板中扩增RPEF基因片段;将目的基因PCR产物和空质粒PET30a(+)同时用BamH Ⅰ和Sal Ⅰ限制性内切酶双酶切,纯化回收后建立连接反应并转化大肠杆菌BL21.将构建的重组质粒PET30a(+)-RPEF经双酶切、PCR、测序鉴定后证明获得正确的重组克隆.结果成功构建出RPEF基因原核重组质粒PET30a(+)-RPEF.序列分析表明,RPEF蛋白与鼠类RNApolymerase Ⅱ延长因子具有很高的同源性.结论RPEF基因在华支睾吸虫基因表达调控机制中可能起重要作用.RPEF基因重组表达载体PET30a(+)-RPEF的成功构建可为更深入地分析其基因功能、肝吸虫病药物靶标的筛选奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	吴忠道	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	171	835	14.0	21.0
3	张咏莉	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	5	38	4.0	5.0
4	吴德	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	25	246	8.0	15.0
5	毕惠祥	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	4	26	4.0	4.0