高生物安全性人内皮抑素载体抑瘤作用的研究

• 作者: 刘华 刘素侠 孙汶生 张利宁 张艳 曹英林 王晓燕 郭春 马春红 高立芬
• 来源期刊: 中国现代普通外科进展
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮抑素·癌 肝细胞·基因疗法
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 350-352,355
• 页数: 4页
• 分类号: R730.5
• 字数: 3161字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9905.2004.06.011

摘要

目的:探索利用内皮抑素(Endostatin)进行肿瘤抗血管基因治疗的效果与安全性.方法:以pVAX1为载体,构建含IgG γ链信号肽序列和Endostatin基因的重组载体pVAX-sEN.重组子经KpnI、EcoRI双酶切及测序鉴定.建立小鼠肝癌细胞H22动物模型,分别瘤内注射重组载体pVAX-sEN、空载体、生理盐水(NS),每周2次,测量肿瘤体积,ELISA检测肿瘤局部Endosatin的表达量,流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡.同时,100μg高剂量pVAX-sEN裸DNA注射实验动物,观察动物的一般状况,20d后处死动物取其内脏病理切片H-E染色.结果:测序结果表明正确构建了含有信号肽及Endostatin的真核表达载体.瘤内注射pVAX-sEN后,ELISA检测到实验组肿瘤局部Endostatin表达量为(201±3.1)ng/ml,而空载体及NS对照组瘤内未见Endostatin特异性表达;瘤体测量证明pVAX-sEN可以抑制肿瘤的生长,重组载体组肿瘤的平均体积为(0.4±0.3)cm3,显著低于对照组[空载体和NS对照组分别为(1.6±0.4)cm3、(1.9±0.6)cm3,P＜0.05］.pVAX-sEN可以增加肿瘤细胞的凋亡,实验组、空载体和NS对照组肿瘤细胞的凋亡率分别为(51.9±3.16)%、(24.6±4.43)%、(18.8±1.2)%,实验组与两组差异均有统计学意义(P＜0.01).高剂量pVAX-sEN注射小鼠后,一般状况良好,病理切片H-E染色未见炎症及其他损伤表现.结论:pVAX-sEN载体体内应用可显著抑制小鼠种植性H22肝癌的生长,促进肿瘤细胞凋亡,高剂量应用无可见毒副作用,是一种具有开发潜力的安全有效基因治疗载体.