普通甲醛固定石蜡包埋组织DNA提取方法的探讨

• 作者: 刘俊峰 张少为 张月峰 李保庆 王福顺 田子强
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 食管肿瘤 癌组织 甲醛固定 石蜡包埋 DNA提取 PCR
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 342-345
• 页数: 4页
• 分类号: R361.2
• 字数: 3170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2004.03.024

摘要

背景与目的:在国内,几乎所有的医院和科研机构均应用普通甲醛固定手术标本,但因为普通甲醛固定石蜡包埋组织中的DNA降解相对严重,从这些蜡块中提取高质量的DNA非常困难.本研究的目的是寻找从普通甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的理想方法.方法:取我院2000年甲醛固定石蜡包埋的手术切除食管癌标本15例,分别以蛋白酶K消化和不同pH值下加热两种裂解方法裂解细胞,以酚氯仿抽提法提取其DNA;并在蛋白酶K消化法进行DNA提取的过程中,应用交叉设计对二戊烯或二甲苯脱蜡、37℃或56℃消化48 h或72 h、氯化钠盐析或酚氯仿抽提4种参数进行研究,所得DNA质量以电泳分析和PCR扩增结果判断.结果:蛋白酶K消化酚氯仿抽提法所得DNA产量(平均值为17.88μg)和质量均高于pH值为7～12条件下的加热提取法(P＜0.05).56℃消化所得的DNA质量明显优于37℃,而消化72 h的DNA亦明显优于48 h者.不同脱蜡方法和抽提方法对DNA的产量和质量影响不大,结论:以蛋白酶K消化氯化钠盐析法,从普通甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA质量较可靠.并且,应用蛋白酶K于56℃消化3天更能获得高质量和高产量的DNA.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘俊峰	河北医科大学第四医院胸外科	102	524	13.0	17.0
2	李保庆	河北医科大学第四医院胸外科	93	467	12.0	16.0
3	王福顺	河北医科大学第四医院胸外科	33	266	10.0	15.0
4	张月峰	河北医科大学第四医院胸外科	47	298	10.0	14.0
5	田子强	河北医科大学第四医院胸外科	63	324	10.0	15.0
6	张少为	河北医科大学第四医院胸外科	24	108	6.0	10.0