铜对Caco-2细胞单层屏障功能的影响

• 作者: 刘志伟 陈佳琳 陈秉衡
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 铜 Caco-2细胞 P-糖蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 406-410
• 页数: 5页
• 分类号: R1
• 字数: 3449字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-9624.2004.06.011

摘要

目的研究铜对Caco-2细胞单层细胞间通透性、P-糖蛋白(P-gp)活性的影响.方法应用Caco-2细胞单层模型,通过测定铜暴露后细胞单层的跨上皮细胞电阻(TEER)来反映通透性的改变;通过免疫荧光和荧光染色观察铜对紧密连接蛋白ZO-1和F微丝的影响;通过测定细胞单层对罗丹明-123的跨膜转运和细胞内罗丹明-123的蓄积来反映P-糖蛋白活性的改变.结果细胞单层顶面铜暴露(30～100 μmol/L,Hanks 缓冲溶液,0～3 h)可导致TEER值呈浓度和时间依赖性降低,同时伴随着F微丝的解聚,但对紧密连接蛋白ZO-1无显著影响;在不影响细胞活性和细胞单层通透性的剂量下,顶面铜暴露(300 μmol/L,完全培养基,24 h)后细胞单层对罗丹明-123的表观通透系数(Papp)BL→AP从对照组的(7.37±0.20)10-6cm/s降低为(6.43±0.27)×10-6 cm/s, PappAP→BL从对照组(1.23±0.05)×10-7cm/s 增加为(3.41±0.08)×10-7cm/s,同时细胞内罗丹明-123的蓄积量从对照组的每膜(0.31±0.01) nmol增加为每膜(0.50±0.03) nmol.结论铜可显著增加Caco-2细胞单层的通透性和抑制P-gp的活性,从而推测可能影响肠道上皮细胞的正常屏障功能.