鼻咽癌组织cDNA文库的构建及抗原基因的筛选

• 作者: 何小鹃 李官成 舒峻
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 鼻咽癌 cDNA文库 SEREX 抗原基因
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 54-58
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 4292字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.01.012

摘要

构建人鼻咽癌组织cDNA文库,以SEREX方法从cDNA文库中筛选鼻咽癌抗原基因.采用确诊鼻咽癌患者新鲜活检癌组织构建cDNA文库,测定原始文库滴度,进行蓝白筛选以确定文库的重组率.以建库组织来源患者的自身血清,采用"一对一" 的血清学方法筛选所构建的cDNA文库,阳性克隆经PCR检测鉴定后进行序列分析.经测定原始文库滴度为7.28×106 pfu/mL,含3.64×106个重组子,重组率为94%,扩增文库滴度为3.8×109pfu/mL,cDNA插入片段大小在0.5～3.0kb之间.文库经三轮血清学筛选共获得23个阳性克隆,分别代表了16个独立的cDNA插入片段(抗原基因).其中10个与已知基因高度同源,另外6个基因与GenBank中已知基因的部分同源,其中有3个是新基因.利用SMART技术构建了高质量的人鼻咽癌组织cDNA表达文库,有利于以cDNA文库为基础的进一步的实验研究.应用SEREX技术初步筛选鼻咽癌组织cDNA文库,共得到16个鼻咽癌相关抗原基因,其中有3个是新基因,可能为鼻咽癌的免疫学研究提供新的研究分子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李官成	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫生物室	65	245	9.0	11.0
2	何小鹃	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫生物室	8	58	4.0	7.0
3	舒峻	中南大学湘雅医学院肿瘤研究所免疫生物室	4	21	2.0	4.0