烟草果胶甲基酯酶(PME)基因的克隆及功能分析

• 作者: 李春波 李毅 钟永旺 高锋 魏春红
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 关键词: 果胶甲基酯酶 序列分析 酵母双杂交 运动蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 643-649
• 页数: 7页
• 字数: 1099字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2004.07.012

摘要

为了研究果胶甲基酯酶(pectin methyl-esterase,PME)(EC 3.1.1.11)与植物病毒运动蛋白之间的相互作用,应用RT-PCR方法从烟草(Nicotiana benthamiana)中克隆了PME基因,并测定了全序列(GenBank登录号AY238968).序列分析显示该基因由两个保守的结构域组成(PMEI和pectinesterase).DNA印迹结果表明,该基因在基因组中存在多个拷贝,蛋白质印迹表明,植物总蛋白中存在两种形式的PME蛋白,但RNA印迹结果显示,在烟草细胞中只检测到全长的PME转录产物.酵母双杂交结果表明,PME与水稻矮缩病毒Pns11(具有非特异的核酸结合活性)之间存在相互作用,而没有检测到PME与已知的运动蛋白Pns6之间的相互作用,推测Pns11蛋白可能参与了水稻矮缩病毒粒子的运动.