马链球菌兽疫亚种中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的克隆与表达

• 作者: 苏良科 陆承平
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 马链球菌兽疫亚种 类M基因 克隆和表达
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 633-636
• 页数: 4页
• 分类号: R378.99
• 字数: 3137字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.07.022

摘要

目的构建马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中国株的类M蛋白基因抗原表位片段的重组表达质粒(pET-Szp),并检测表达产物的免疫反应性.方法根据GenBank登录的马链球菌兽疫亚种纽约分离株w60类M蛋白基因序列设计和合成引物,以该菌中国分离株ATCC35246的基因组DNA为模板,扩增类M蛋白基因5'端第583～1068bp片段,并按正确的阅读框架定向克隆到表达载体pET-32a(+)中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21株,用IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE和免疫印迹对表达蛋白进行初步分析.结果扩增出486bp的马链球菌兽疫亚种ATCC35246的类M蛋白基因片段,该基因在大肠杆菌表达系统中经诱导,得到分子量为50 000的表达产物,免疫印迹表明该产物具有特异的免疫反应性.结论成功构建了表达马链球菌兽疫亚种中国株类M蛋白片段的重组表达质粒,并实现在大肠杆菌中表达,为重组类M蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆承平	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	387	5495	37.0	51.0
2	苏良科	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室	5	36	4.0	5.0