ES细胞体外定向分化为成熟肝细胞的实验研究

• 作者: 何晓青 单于 戴云 李凌松 洪岸 潘运龙 胡安斌 蔡继业 郑启昌
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 胚胎干细胞 肝细胞 定向分化
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 518-522
• 页数: 5页
• 分类号: Q254
• 字数: 3888字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2004.06.007

摘要

探讨了肝细胞在胚胎干细胞(ES cell)体外诱导分化系统中成熟分化的条件、机制及其鉴定方法.利用TGF,bFGF、HGF等细胞生长因子进行BALB/c小鼠ES细胞向肝细胞方向的定向诱导.利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫细胞化学(ICC)和放射免疫法(RIA)动态检测肝细胞特异性基因和蛋白AFP,ALB,G6P,TAT,CK8,CK18等在培养体系中的表达,并测定肝细胞的尿素合成功能,最后测定肝细胞分化率.结果,肝细胞特异基因AFP,ALB,G6P和TAT最早分别于第3、9、11、13天表达,肝细胞特异蛋白AFP,CK8,CK18和ALB最早分别于第7、9、9和11天开始表达.第12天开始检测到尿素出现,浓度为8.3 μmol/L,并随培养时间延长而浓度逐渐增加.最后,测得生长因子诱导组肝细胞的分化率为32%,对照组肝细胞分化率为8%.说明肝细胞可以在ES细胞体外诱导分化系统中出现并成熟分化,bFGF、HGF、OSM等可以明显提高细胞分化率和成熟度,有望成为解决肝功能替代疗法中细胞来源问题的新希望.