苜蓿根瘤菌乙酰-CoA合成酶的过量表达、纯化及特性

• 作者: 张成刚 戴美学
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苜蓿根瘤菌 乙酰辅酶A合成酶 过量表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 页码范围: 113-115
• 页数: 3页
• 分类号: Q939.114:Q78
• 字数: 3001字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-687X.2004.01.026

摘要

PCR扩增了苜蓿根瘤菌乙酰辅酶A合成酶编码基因 (acsA1),克隆到连接-非依赖型载体pET30 LIC;在E.coli BL21(DE3)pLysS中得到了有效表达,表达需IPTG 的诱导,诱导3 h 达到酶活高峰.采用His*Bind 柱层析对ACS进行了纯化,纯化的酶蛋白经SDS-PAGE呈单一浓带,分子量约72 000,具较高的酶活,是无细胞提取液的12.7倍.酶动力学分析显示,Vmax 、Km分别为(413.6±11.7) mmol L-1 和(5.8±0.6) mmol L-1. 图4 表2 参8

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	戴美学	山东师范大学生命科学学院	30	159	7.0	11.0
2	张成刚	中国科学院沈阳应用生态研究所	66	1575	21.0	38.0