MUC1/Y基因体外冲击树突状细胞诱导抗瘤免疫反应

• 作者: 任秀宝 刘虹 尹志伟 郝希山
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 消化道肿瘤 MUC1/Y 基因疫苗
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 肿瘤免疫学
• 页码范围: 461-466
• 页数: 6页
• 分类号: R735.2
• 字数: 5606字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备含MUC1/Y cDNA质粒转染的树突状细胞(DC),体外诱导杀伤细胞,研究其治疗消化道肿瘤的效果.方法:构建MUC1/Y cDNA真核表达载体pIRES2-EGFP-MUC1/Y、pcDNA3.1-MUC1/Y.以pcDNA3.1-MUC/Y电转染8例HLA-A2(+)消化道肿瘤患者单个核细胞衍生的DC后,与自体T细胞混合培养,诱导CTL(T-pcDAN3.1-MUC1/Y).以SW620细胞[HLA-A2(+)、MUC1/Y(+)]为特异性靶细胞,Raji细胞[HLA-A2(-)、MUC1/Y(-)]和Lovo细胞[HLA-A2(-)、MUC1/Y(+)]为非特异性靶细胞,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定杀伤活性,ELISA法检测基因修饰后DC刺激自体T细胞产生IFN-γ的能力,并以ANNEXIN V-FITC试剂盒检测特异性CTL诱导靶细胞凋亡情况.结果:pIRES2-EGFP-MUC1/Y转染效率为8%左右.T-pcDAN3.1-MUC1/Y诱导的杀伤作用显著高于T-pcDNA3.1[pcDNA3.1(+)修饰DC诱导的CTL]和T-IL-2(IL-2刺激外周血单个核细胞产生的CTL),P＜0.05.而且T-pcDNA3.1-MUC1/Y对靶细胞的杀伤和诱导凋亡的能力显著高于对照组.基因修饰后的DC能刺激自体T细胞分泌高水平IFN-γ,与未转染的DC相比具有显著差异(P＜0.05).结论:成功构建MUC1/Y全长cDNA真核表达载体.pIRES2-EGFP-MUC1/Y可用于真核细胞转染,通过观察转染效率,易于筛选阳性克隆;经pcDNA3.1-MUC1/Y修饰的DC可有效诱导特异性抗肿瘤免疫应答.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝希山	天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科	186	2015	24.0	36.0
2	任秀宝	天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科	80	603	13.0	22.0
3	刘虹	天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科	24	225	7.0	14.0
4	尹志伟	天津医科大学附属肿瘤医院头颈外科	7	23	3.0	4.0