人正常肾组织全长cDNA文库的构建及鉴定

• 作者: 成瑜 李旭 杨玉琮 赵乐 陈葳
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 肾组织 cDNA文库 全长
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 217-219
• 页数: 3页
• 分类号: R394.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2004.03.003

摘要

目的构建人正常肾组织的cDNA文库并鉴定文库质量.方法运用mRNA 5′末端的模板转换方法以powerscript 逆转录酶进行转录,在mRNA 的5′末端添加一段5′-oligo做为延伸后的模板,从而富集全长cDNAs.扩增后的cDNAs经sfiⅠ酶切、柱层析洗脱,重组于λTripIEx2载体并包装后,测定滴度、重组率,扩增文库.随机挑取8个噬菌斑行PCR反应扩增插入片段.结果构建的cDNA文库滴度为2.6×106pfu*mL-1, 重组率>95%, 扩增后滴度达9×1011pfu*mL-1.8个插入片段长度为0.7～2.0 kb.结论构建的人正常肾组织cDNA文库为高效全长的cDNA文库,符合cDNA文库的要求,可以用探针、抗体等做免疫学筛选, 进一步探寻与肾脏疾病相关的基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭	西安交通大学第一医院医学实验中心	136	613	11.0	16.0
2	陈葳	西安交通大学第一医院医学实验中心	135	538	11.0	15.0
3	杨玉琮	西安交通大学第一医院医学实验中心	45	193	8.0	11.0
4	赵乐	西安交通大学第一医院医学实验中心	17	83	6.0	7.0
5	成瑜	西安交通大学第一医院医学实验中心	3	7	2.0	2.0