选择性扩增外周血和支气管肺泡灌洗液中γδT细胞的研究

• 作者: 倪望 刘先胜 张珍祥 徐永健 李超乾 杨丹蕾 钟小宁 陈仕新
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: γδT细胞 培养 支气管肺泡灌洗液 攻击洗淘法
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 337-339
• 页数: 3页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2004.03.026

摘要

目的: 探讨选择性扩增外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中γδT细胞的方法, 以获得高纯度的γδT细胞亚群.方法: 应用梯度离心法分离大鼠(n=10)外周血和BALF中的单个核细胞, 经贴壁除去单核/巨噬细胞后, 用补体攻击αβT细胞, 再用抗TCRγδ单克隆抗体(mAb)通过固相法加IL-2刺激选择性培养扩增γδT细胞(简称"攻击洗淘法"); 通过细胞生长曲线观察细胞增殖变化, 采用免疫组化法和流式细胞仪检测鉴定γδT细胞纯度.结果: PBMC和BALF中的γδT细胞在抗TCRγδ mAb和IL-2存在下, 无须再用抗原刺激, 能维持较长时间增殖; 经"攻击洗淘法"纯化后扩增的γδT细胞纯度达到81%～99%.结论: "攻击洗淘法"能高度纯化扩增外周血和BALF中的γδT细胞.