MDR1短发夹RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

• 作者: 周新 张吉发 张有顺 戴宗晴 王菊 胡礼仪 袁房均 黄玲
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 多药耐药 MDR1 mRNA 短发夹状RNA RNA干扰 BEL-7402/ADM细胞
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 542-545
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|R737.9
• 字数: 3739字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2004.06.006

摘要

目的构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)的表达质粒,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1 mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响.方法根据Genbank中MDR1 mRNA设计的两条多聚核苷酸序列,退火形成双链DNA,再与经双酶切后的载体PGE-1连接,构建pshRNA-MDR1重组质粒,在脂质体的介导下转染肝癌细胞株BEL-7402/ADM,RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,MTT法检测阿霉素对细胞的半数抑制浓度(IC50).结果PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功,并能明显地抑制BEL-7402/ADM MDR1 mRNA的表达,对阿霉素的耐药指数降低了17.5倍(299.2/17.1).结论构建的pshRNA-MDR1表达质粒能有效地抑制转染细胞MDR1 mRNA,从而提高肿瘤细胞的药物敏感性.