Trichloroethylene改变融合期内皮细胞一氧化氮和氧自由基的平衡

• 作者: Kirkwood A.Pritchard Jr 区景松 欧志君
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 热休克蛋白 90 一氧化氮合酶 一氧化氮 氧自由基 内皮细胞
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 496-503
• 页数: 8页
• 分类号: R363.2+1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2004.06.002

摘要

[目的] Trichloroethylene (TRI) 是一种与先天性心脏病发生有关的环境污染物,我们最近报道在分裂期的内皮细胞( EC)中, TRI可以通过减少热休克蛋白 90( hsp90)与内皮一氧化氮合酶( eNOS)结合,从而抑制刺激状态下一氧化氮( NO)产生和增加刺激状态下 eNOS依赖的超氧阴离子自由基(O2)产生和抑制血管内皮生长因子刺激的内皮细胞分裂.但 TRI在融合期 EC中的影响仍未清楚.本实验目的是探讨 TRI对融合期 EC的影响.[方法] TRI 5 μ mol/L 预处理融合期 EC,用钙离子导体 A23187 5 μ mol/L 刺激,然后,检测 NO与(O2)的产生以了解 EC和 eNOS的功能情况.用免疫印迹方法检查 eNOS,位点于丝氨酸 1179的磷酸化 eNOS,与 eNOS结合的 hsp90水平来决定 eNOS的激活状态.[结果] TRI减少 A23187刺激状态下亚硝酸盐和硝酸盐的产生从 (1.16 ± 0.15) nmol· mg- 1到 (0.91 ± 0.3) nmol· mg- 1 (P < 0.05);在对照情况下, L- NAME 增加 A23187 刺激状态下的(O2)产生从 (0.015 ± 0.007) nmol/(min· mg)到 (0.044 ± 0.008) nmol/(min · mg) (P< 0.05);在 TRI处理的培养中, L- NAME 减少 A23187刺激状态下的产生从 (0.057 ± 0.022) nmol/(min · mg)到 (0.039 ± 0.005) nmol/(min · mg) (P< 0.05),并且 oxypurinol减少 A23187刺激状态下的(O2)产生从 (0.057 ± 0.022) nmol/(min · mg)到 (0.034 ± 0.012) nmol/(min · mg) (P< 0.05); TRI 对 eNOS, p- eNOS 和 hsp90的表达无影响,但减少 hsp90与 eNOS的结合.[结论] 这些数据表明,在融合期 EC中, TRI 不但改变 hsp90与 eNOS 结合,使 eNOS 从产生 NO变为产生 (O2),而且激活第二氧化酶-黄嘌呤氧化酶,而增加(O2)产生.这些内皮功能的改变可能导致许多心血管疾病的发生.