靶向抑制survivin对胰腺癌细胞增殖和凋亡效应的影响

• 作者: 孟化 戴德坚 赖日勇 郭俊明 陆才德
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 寡核苷酸类,反义 胰腺肿瘤 脱噬作用 基因疗法
• 年，卷（期）: 2004,（22）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 1894-1898
• 页数: 5页
• 字数: 3857字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2004.22.014

摘要

目的探讨反义survivin-脂质体复合物对胰腺癌细胞增殖和凋亡效应的影响及机制,为胰腺癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据. 方法用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染胰腺癌细胞系PANC-1细胞;通过RT-PCR、Western 印迹试验检测survivin表达水平;MTT法测量细胞生长情况;流式细胞术测定caspase-3活性及凋亡率;电镜观察细胞形态学变化;应用激光共聚焦显微镜免疫荧光分析法评价脂质体反义复合物在亚细胞水平对survivin蛋白分子的影响. 结果反义survivin脂质体复合物有效下调survivin表达水平,并呈剂量依赖关系,IC50值为300 nmol/L,最大效应浓度为500 nmol/L,此时表达水平下调了80%.类似细胞生长抑制结果为MTT实验所证实.与此同时,caspase-3活性和凋亡率随转染时间延长而逐渐递增,并出现凋亡形态学变化,如胞浆空泡变性、核浓缩和核碎裂.免疫荧光分析,标记有FITC-绿荧光染色的survivin蛋白分子在未转染的细胞浆中清晰可见,并呈"斑点"状分布;而在转染细胞中几乎没有发现,但是符合细胞凋亡的形态学特征.结论靶向抑制联系细胞增殖和凋亡的关键分子-survivin在胰腺癌治疗中有良好的应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭俊明	宁波大学医学院生物化学与分子生物学教研室	71	401	10.0	17.0
2	赖日勇	赣南医学院生物化学与分子生物学教研室	20	73	4.0	8.0
3	孟化	浙江大学医学院附属第二医院普外科	6	26	2.0	5.0