N-端缺失突变核糖核酸酶抑制因子在毕赤酵母中的克隆与表达

• 作者: 吴妍宁 吴毓 崔秀云 王继红 赵宝昌
• 来源期刊: 水产科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 核糖核酸酶抑制因子 缺失突变 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2485字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-1111.2004.09.006

摘要

人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50kDa的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半胱氨酸.作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来的胰RNase的侵袭,同时做为RNase抑制剂在各实验室广为应用.HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N-末端、C-末端在空间上较为接近.本文用PCR的方法在HRI cDNA 5'端去除30个碱基,并将此缺失突变的HRI的cDNA片段构建于质粒pPIC9K,PCR和双酶切鉴定结果为阳性,测序结果证实在HRI cDNA 5'端成功引入30个碱基的缺失突变.电击转化入毕赤酵母(Pichia pastores)GS115中,进行分泌型表达.对表达产物进行亲和层析纯化.经SDS-PAGE和Western-blot免疫印迹杂交,证实表达产物为N-端缺失突变的核糖核酸酶抑制因子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔秀云	大连医科大学生物化学与分子生物学教研室	47	355	12.0	17.0
2	赵宝昌	大连医科大学生物化学与分子生物学教研室	40	199	6.0	12.0
3	吴毓	辽宁师范大学生命科学学院	9	91	5.0	9.0
4	王继红	大连医科大学生物化学与分子生物学教研室	6	43	3.0	6.0
5	吴妍宁	大连医科大学生物化学与分子生物学教研室	4	25	2.0	4.0