转染抗mdr-1核酶基因逆转肿瘤细胞耐药性的研究

• 作者: 周庚寅 周成军 孙妍琳 张庆慧 甄军晖 高鹏
• 来源期刊: 中华病理学杂志
• 关键词: 乳腺肿瘤 抗药性,肿瘤 转染 基因,MDR
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 实验病理学
• 页码范围: 251-254
• 页数: 4页
• 字数: 3902字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-5807.2004.03.015

摘要

目的研究转染抗mdr-1核酶基因能否实现对乳腺癌细胞多药耐药(MDR)的持久逆转.方法构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的核酶表达质粒并转染耐阿霉素的人乳腺癌细胞株MCF-7/ADR和敏感株MCF-7,激光共聚焦显微镜观察EGFP的表达,流式细胞术检测细胞转染率和P-糖蛋白含量,逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)检测细胞的mdr1 mRNA,罗丹明123(Rh123)外排实验检测细胞的P-糖蛋白转运功能.加入阿霉素48 h后,常规MTT法检测细胞存活率.结果转染抗mdr-1核酶质粒RZ196和RZ179后,两组实验细胞的mdr-1指数由2.20分别降为0.76和1.40,P-糖蛋白表达率由55.0%降为4.6%和18.2%,Rh123荧光强度由22.0%升为46.2%和70.1%,细胞存活率由75%降为28%和43%.并且核酶质粒可在细胞内稳定表达,转染RZ196、RZ179的实验细胞经G418筛选完成2个月后,细胞质中仍可见明显的EGFP表达,细胞的mdr-1指数分别为0.81、4.17,P-糖蛋白表达率分别为5.2%、19.5%,Rh123荧光强度分别为51.4%、71.6%,与刚完成筛选时的差异无显著性(P>0.05).结论转染抗mdr-1核酶质粒RZ196和RZ179均可持久逆转肿瘤细胞MDR,其中RZ196的逆转效果更好.