子宫内膜癌细胞中[12Asp]K-ras4B基因对雌激素受体亚型转录活性的影响

• 作者: 孙蓬明 屠铮 徐明旭 李小平 桂黎明 王建六 钟英成 马大龙 魏丽惠
• 来源期刊: 中华妇产科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 子宫内膜肿瘤 肿瘤细胞,培养的 受体,雌激素 转录,遗传 基因,ras
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 3901字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0529-567X.2004.01.011

摘要

目的探讨人子宫内膜癌细胞株HEC-1A细胞ras基因第12密码子中突变型(即[12Asp]K-ras4B基因)对雌激素受体(ER)及其亚型α、β蛋白的表达和转录活性的影响.方法 (1)用蛋白免疫印迹法检测[12Asp]K-ras4B基因对ERα、ERβ蛋白表达的影响.(2)构建含荧光素酶报告基因和ER反应元件(ERE)的真核表达质粒pGL3-ERE-luciferase,与表达绿色荧光蛋白的pEGFP-N1质粒共同转染鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞及HEC-1A细胞,观察雌二醇调节[12Asp]K-ras4B基因对ER的转录活性;分别转染含有全长野生型ERα cDNA的pSV5-HER0和抑制raf基因的pCMV-rafS621A, 探讨[12Asp]K-ras4B/raf信号通路对ER转录活性的调节作用.结果 (1)NIH3T3细胞转染pcDI-[12Asp]K-ras4B质粒与转染空载体pcDI质粒比较,ERα表达水平增加3.6倍(分别为97±25和349±67,P<0.01),ERβ增加1.9倍(分别为128±37和249±30,P<0.05).(2)pCMV-rafS621A质粒分别转染到含pcDI-[12Asp]K-ras4B质粒的NIH3T3细胞和HEC-1A细胞,转染前、后NIH3T3细胞ERα蛋白表达水平分别为724±45和310±46(P<0.05),ERβ蛋白表达水平分别为493±20和284±20(P<0.01);转染前、后HEC-1A细胞ERα蛋白表达水平分别为566±22和279±30(P<0.01),ERβ蛋白表达水平分别为405±33和165±15(P<0.01).(3)与未加雌二醇的对照比较,雌二醇刺激含pcDI-[12Asp]K-ras4B质粒的NIH3T3细胞和HEC-1A细胞后,可使ER转录活性增强,分别增加13倍(分别为130±42和1681±242, P<0.01)和19倍(分别为141±39和2644±337,P<0.001).(4)转染pSV5-HER0到含pcDI-[12Asp]K-ras4B质粒的NIH3T3细胞和HEC-1A细胞后,与未转染细胞比较,细胞荧光素酶活性分别增加8倍(分别为1014±91和8099±452,P<0.01)和6倍(分别为2148±259和12 705±2670,P<0.001);转染pCMV-rafS621A质粒到含pcDI-[12Asp]K-ras4B质粒的NIH3T3细胞和HEC-1A细胞后,NIH3T3细胞转染前、后荧光素酶活性分别为1184±168和152±27(P<0.05),HEC-1A细胞分别为1949±212和304±60(P<0.01).结论 (1)[12Asp]K-ras4B/raf 信号通路调节HEC-1A细胞ERα和ERβ蛋白的表达;(2)在雌二醇的作用下,[12Asp]K-ras4B基因对HEC-1A细胞的ER转录活性有影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小平	北京大学人民医院妇科	158	792	12.0	21.0
2	王建六	北京大学人民医院妇科	596	4427	29.0	45.0
3	魏丽惠	北京大学人民医院妇科	508	4482	30.0	44.0
4	马大龙	北京大学人民医院人类疾病遗传研究中心	71	944	16.0	28.0
5	屠铮	北京大学人民医院妇科	42	426	11.0	19.0
6	钟英成	北京大学人民医院人类疾病遗传研究中心	6	70	4.0	6.0
7	桂黎明	北京大学人民医院妇科	5	14	2.0	3.0
8	徐明旭	北京大学人民医院人类疾病遗传研究中心	6	37	4.0	6.0
9	孙蓬明	北京大学人民医院妇科	18	157	6.0	12.0