白细胞中与NS5ATP5蛋白结合的蛋白基因的筛选与克隆

• 作者: 刘敏 张健 成军 李强 梁耀东 王琳 邵清 陆荫英
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 51-53
• 页数: 3页
• 分类号: R575
• 字数: 3177字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.01.013

摘要

目的:采用酵母双杂交体系寻找与NS5ATP5相互作用的白细胞蛋白,以探讨NS5ATP5的生物功能.方法:应用酵母双杂交系统3,构建NS5ATP5诱饵质粒,转化酵母AH109,与含人白细胞cDNA文库质粒的酵母Y187进行配合,于涂有x-α-gal营养缺陷型培养基上筛选生长.挑选蓝色克隆,提取此酵母克隆的质粒转化大肠杆菌提取质粒DNA后进行测序,然后进行生物信息学分析.结果:筛选出10个与NS5ATP5特异性相互作用的克隆,其中1个为金属硫蛋白,1个为热休克蛋白HSP60,1个为主要组织相容性复合体Ⅱ淋巴细胞抗原DQB,5个为人类重排免疫球蛋白λ-轻链,2个是未知功能基因.结论:初步克隆了NS5ATP5与白细胞结合蛋白基因,对NS5ATP5的功能研究有一定的提示作用;为以后研究这些能与NS5ATP5相互作用的基因在白细胞中的生理功能奠定了基础.