反义寡核苷酸阻遏角蛋白14的表达

• 作者: 刘玉峰 李巍 樊建勇 陈玉欣 高天文
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 寡核苷酸类,反义 角蛋白 角蛋白细胞 脂质体
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 224-226
• 页数: 3页
• 分类号: R6
• 字数: 2926字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2004.04.012

摘要

目的研究脂质体介导角蛋白K14反义寡核苷酸(ASODN)阻遏人角质形成细胞K14基因和蛋白的表达及抑制体外增殖活性的效果.方法人表皮角质形成细胞原代培养,3～10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导入角质形成细胞,应用流式细胞仪、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化(SABC)方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.结果脂质体介导的K14反义寡核苷酸转染角质形成细胞后,能有效地抑制角质形成细胞中K14基因的表达;48 h后可阻遏K14蛋白表达;流式细胞仪检测见反义寡核苷酸处理组细胞周期发生明显改变,G1期细胞百分率上升,S期细胞百分率下降.而正义寡核苷酸组、错义寡核苷酸组及空白对照组均无此变化.结论应用反义技术封闭K14基因,可以阻遏角蛋白K14基因和蛋白的表达,并可以抑制体外培养的角质形成细胞的增殖.