抑制性消减杂交筛选生长期毛乳头细胞差异表达基因

• 作者: 向明明 宋志强 杨卫兵 杨希川 程波 郝飞 钟白玉
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 毛囊 斑秃 基因文库 抑制性消减杂交
• 年，卷（期）: 2004,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 645-647
• 页数: 3页
• 字数: 2361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2004.11.007

摘要

目的应用抑制性消减杂交构建生长期毛囊毛乳头细胞(DPC)差异表达cDNA消减杂交文库,从中克隆鉴定出差异表达基因.方法分别从生长期DPC及休止期DPC提取总RNA;采用SMARTcDNA合成技术合成cDNA,进行2次消减杂交及2次抑制性PCR;将产物与T/A载体连接构建生长期毛囊DPC的cDNA消减文库,通过反向RNA印迹杂交验证阳性克隆,测序并登录基因库寻找同源性基因.结果成功构建了毛囊生长期DPC消减文库,并获得35个阳性克隆,其中功能已知基因22个,功能未知基因13个.结论抑制性消减杂交技术是一种高效的筛选差异基因的方法,并可用于小量临床标本研究,本实验所发现的生长期DPC差异表达基因对今后研究毛囊生长调控可能具有重要意义.