RNA干扰介导对乙型肝炎病毒复制的抑制作用

• 作者: Tong-Chuan He 唐霓 张秉强 蒲丹 闫歌 高小玲 黄爱龙
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗病毒治疗 乙型肝炎病毒 RNA干扰 病毒复制 基因治疗
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 1145-1150
• 页数: 6页
• 分类号: R5
• 字数: 4575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2004.12.006

摘要

构建针对乙型肝炎病毒(HBV)核心区或表面抗原编码区的siRNA表达载体pSI-C和pSI-S,在体外HBV复制细胞模型中观察对HBV复制和表达的影响.将pSI-C,pSI-S与1.3倍HBV真核表达质粒pHBV共转染HepG2细胞,分别在转染后24,48和72 h,观察pSI-C和pSI-S对细胞上清和胞内病毒抗原表达的影响,并用分子杂交方法从病毒复制、转录和翻译水平检测目的基因的表达情况.实验结果表明,pSI-C及pSI-S能明显抑制细胞内HBsAg和HBcAg的合成,呈序列特异性和剂量依赖性的特点,而对照组siRNA无抑制作用.pSI-C比pSI-S抑制作用更强,转染后第2天对HBsAg和HBeAg抑制率达高峰,分别为92%和85%.Southern和Northern杂交结果表明,HBV siRNA能降低目的基因转录和病毒复制中间体的表达水平,提示针对乙型肝炎病毒核心区和表面抗原编码区的siRNA能有效抑制HBVRNA分子转录和病毒复制,最终降低病毒抗原表达,这为运用RNAi技术进行HBV基因治疗提供了新的思路.