RNA干扰技术靶向hTERT基因治疗肝癌的实验研究

• 作者: 周亚莉 张鹏辉 杨明清 涂植光 邹琳 黄文方
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 RNA干扰 hTERT 基因治疗 可行性 特异性
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 619-625
• 页数: 7页
• 分类号: R737.9
• 字数: 4836字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2004.06.003

摘要

背景与目的:RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA介导的、在转录后mRNA水平关闭相应基因表达的新基因阻断技术,在基因功能研究、基因治疗方面已显示出巨大的前景.目前,利用RNAi已抑制了包括cyclophilin、GAPDH、p53、c-myc在内的多个内源基因的表达.同时在艾滋病、病毒性肝炎等的治疗研究中也已取得一定进展.但对肝癌等恶性肿瘤中高表达的hTERT基因,国内外还未见相关研究报道.本研究利用RNAi技术,在体内外抑制hTERT基因表达,探讨RNAi对肝癌治疗的可行性.方法:设计干扰hTERT基因的小片段RNA,构建重组表达质粒pTZU6+1-shRNA-hTERT并导入肝癌SMMC7721细胞株和裸鼠移植瘤,在体内外诱导RNAi,采用流式细胞检测技术、RT-PCR法、免疫组化等同时检测RNAi治疗组和对照组hTERT基因表达及细胞增殖变化.结果:体外细胞实验显示,重组质粒pTZU6+1-shRNA-hTERT导入肝癌SMMC7721细胞株3～7天后,肝癌细胞生长抑制率达37.5%;细胞周期相分布发生显著变化,S期细胞明显减少,G1/G0期细胞显著增加;hTERT的mRNA表达由99.4%下调到53.1%,hTERT蛋白表达由86.3%下调到46.6%.裸鼠体内实验结果显示,质粒pTZU6+1-shRNA-hTERT注射裸鼠皮下移植瘤7天后,瘤体积明显缩小,hTERT的mRNA表达由99.1%下调到76.2%,hTERT蛋白表达由87.2%下调到61.8%.体内、外对照组各指标均无变化.结论:RNAi明显抑制了靶基因hTERT的表达及肝癌细胞增殖,是潜在的肿瘤治疗新方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨明清	四川省人民医院检验科	73	372	11.0	16.0
2	黄文方	四川省人民医院检验科	33	191	7.0	12.0
3	涂植光	重庆医科大学医学检验系	172	1533	19.0	32.0
4	张鹏辉	重庆医科大学医学检验系	18	158	5.0	12.0
5	邹琳	重庆医科大学医学检验系	44	193	6.0	12.0
6	周亚莉	重庆医科大学医学检验系	4	85	4.0	4.0