流式细胞仪快速优化大鼠原代培养肝细胞基因转染

• 作者: 周晓东 王金林 闵军 陈积圣 魏菁
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 流式细胞仪 黄色荧光蛋白 转染 脂质体 细胞,培养的 内皮生长因子
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 237-240
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2004.03.011

摘要

[目的]用流式细胞仪(FCM)快速检测外源性血管内皮生长因子基因(VEGF基因)在大鼠原代培养肝细胞转染表达,根据结果优化其转染表达条件.[方法]以加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)为标记,用FCM快速检测重组质粒pIRES-EYFP/VEGF121在大鼠原代培养肝细胞中转染表达,根据结果优化pIRES-EYFP/VEGF121转染表达条件.[结果]pIRES-EYFP/VEGF121得以成功构建,并转染大鼠原代培养肝细胞;优化的转染表达条件:在细胞数密度0.1×106/mL,质粒孵育时间30 min,质粒与脂质体混合物孵育时间15 min,质粒与脂质体比例为1:10,转染时间2 h,NAIR-1作转染培养液时,转染效率达17.5%.[结论]以EYFP为标记,FCM可简便快捷地检测并优化外源性VEGF基因在大鼠原代培养肝细胞转染表达,可为研究VEGF基因修饰大鼠原代培养肝细胞移植和肝基因治疗打基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈积圣	中山大学附属第二医院肝胆外科	122	861	16.0	22.0
2	魏菁	中山大学附属第二医院医学研究中心	83	535	12.0	16.0
3	闵军	中山大学附属第二医院肝胆外科	75	343	10.0	14.0
4	周晓东	中山大学附属第二医院医学研究中心	12	37	4.0	5.0
5	王金林	中山大学附属第二医院肝胆外科	2	8	2.0	2.0