狂犬病的分子生物学诊断

• 作者: 兰喜 张兴旺 李宝玉 李志勇 柳纪省 殷相平 王辉 胡永浩
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 狂犬病 分子生物学 诊断
• 年，卷（期）: 2004,（5）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 47-50
• 页数: 4页
• 分类号: S852.655
• 字数: 2616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2004.05.013

摘要

从攻击咬伤人并致其死亡的犬脑组织中提取总RNA,用特异性引物通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得了长度约为1 423 bp的核酸片段,与预期的片段大小相符;将扩增产物连接到pMD 18-T 载体中,转化大肠埃希氏菌JM109,筛选氨苄青霉素抗性菌落,提取质粒,经酶切鉴定、PCR分析及测序,证明所克隆的1 423 bp片段含有完整的狂犬病病毒N基因,与国外参考毒株的序列相比同源性较高,从而做出正确的诊断.试验表明,用RT-PCR技术检测狂犬病病毒灵敏度高、特异性强,适合于实验室应用.