沙眼衣原体主要外膜蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定

• 作者: 余敏君 吴移谋 李忠玉 陈超群
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 衣原体,沙眼 细菌外膜蛋白质类 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 709-711
• 页数: 3页
• 字数: 2788字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:0412-4030.2004.12.009

摘要

目的克隆沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,构建原核表达重组载体,并通过E.coliBL21实现MOMP的融合表达.方法用PCR法扩增MOMP基因,克隆插入到pUCm-T载体中,序列测定正确后,将其亚克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,采用Ni-NTA亲和层析法纯化表达产物,对表达产物进行SDS-PAGE和蛋白质印迹鉴定.结果PCR扩增出约1 200bp DNA片段,序列测定证实与基因库登陆的D型沙眼衣原体一致;表达产物的相对分子质量为47000,与预期分子质量相符,蛋白印迹证实表达产物为特异性蛋白.结论沙眼衣原体MOMP基因可以在大肠杆菌中得到表达,其表达产物能与相应的抗体结合,为沙眼衣原体核酸疫苗的研究奠定了基础.