荧光差异显示PCR克隆大鼠脑缺血相关基因KIAA0280

• 作者: 皮荣标 臧林泉 苏兴文 邱鹏新 银巍 颜光美
• 来源期刊: 中山大学学报(医学科学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 差异显示PCR 大鼠 脑缺血 基因
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 97-101
• 页数: 5页
• 分类号: R743.302
• 字数: 4013字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1672-3554.2004.02.001

摘要

[目的]研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血组织与非缺血组织中基因表达的差异,克隆出与脑缺血相关的基因.[方法]应用荧光差异显示PCR(FDD PCR)从同一例大鼠大脑皮层缺血组织和非缺血组织中筛选出有表达差异的基因片段,经反向Northern blot杂交,将杂交阳性的片段且经RT-PCR反复验证,选取差异明显的片段进行克隆测序;经生物信息学分析处理,选取同源性低的EST片段R6,利用cDNA5'端快速扩增PCR(5'RACE法)进行基因全长的克隆.[结果]利用5'RACE法成功地克隆EST片段R6至编码区,扩增并获取全长4 821 bp及完整的可读框(ORF),RT-PCR及Northern blot印迹结果证实了克隆的结果,同源性分析发现该基因ORF与人大脑中已知的KIAA0280基因高度同源,同源性96%,编码166个氨基酸,为结构及功能未明确蛋白质,该基因定位于大鼠第11号染色体长臂(11q.13).[结论]应用荧光差异显示PGR成功地自大鼠体内克隆到与人KIAA0280相似的基因,其在大鼠急性局灶性脑缺血中明显上调,该蛋白质结构及功能均未见报道及研究,其显著地差异表达提示其在脑缺血病理过程中具有重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	皮荣标	中山大学基础医学院药理教研室	24	233	8.0	15.0
2	银巍	中山大学基础医学院药理教研室	20	97	5.0	9.0
3	臧林泉	中山大学基础医学院药理教研室	14	73	6.0	8.0
4	苏兴文	中山大学基础医学院药理教研室	22	128	6.0	10.0
5	邱鹏新	中山大学基础医学院药理教研室	42	205	7.0	12.0
6	颜光美	中山大学基础医学院药理教研室	38	166	7.0	10.0