应用PCR-反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌耐链霉素基因型

• 作者: 吴雪琼 张俊仙 曹立雪 李洪敏 梁建琴
• 来源期刊: 中国医师杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 链霉素 药物耐受性 基因变异 反向斑点杂交
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1170-1172
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 3037字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1008-1372.2004.09.007

摘要

目的应用膜反向斑点杂交技术快速检测结核分枝杆菌对链霉素(SM)的耐药性.方法设计与合成用于检测结核分枝杆菌耐SM基因rpsL和 rrs的寡核苷酸探针,点于硝酸纤维素膜上,与结核分枝杆菌分离株生物素标记的聚合酶链反应(PCR)产物进行反向斑点杂交,并与PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)和PCR-直接测序(PCR-DS)结果比较.结果 53株结核分枝杆菌临床分离株中,三种检测方法符合率为100%.9株敏感株rpsL和rrs基因的SSCP图谱、膜杂交结果与标准株完全相同;44株耐SM菌株中, 33株存在rpsL基因43位密码子AAG→AGG突变,6株有rrs基因513位A→C突变,1株有rrs基因513位A→T突变,突变检出率为90.9%,40株耐SM菌株和9株敏感株可用膜杂交方法检测出来,与传统药敏试验方法检测符合率为49/53.结论应用膜反向斑点杂交技术检测结核分枝杆菌耐SM基因型灵敏度高、特异性好、简便、快速,可用于临床耐药性检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴雪琼	解放军第三零九医院结核病研究中心	70	631	15.0	20.0
2	张俊仙	解放军第三零九医院结核病研究中心	35	237	9.0	13.0
3	李洪敏	解放军第三零九医院结核病研究中心	48	232	8.0	13.0
4	梁建琴	解放军第三零九医院结核病研究中心	34	200	8.0	12.0
5	曹立雪	解放军第三零九医院结核病研究中心	4	26	3.0	4.0