大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和向软骨细胞表型定向分化的实验研究

• 作者: 丁晓飞 杨志 苏伟 赵劲民 陈维平
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 间充质干细胞 骨髓 细胞培养 软骨 分化 体外
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 179-182
• 页数: 4页
• 分类号: Q28
• 字数: 2920字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2004.02.009

摘要

目的:探讨分离骨髓间充质干细胞(MSCs)并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法,为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据.方法:抽取大鼠四肢骨髓,Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法得到MSCs,在含15%FBS的低糖DMEM培养液中,置于37 ℃,5%CO2培养箱内培养10～14 d.传代后以15%FBS的高糖DMEM培养液(含TGF-β1 10 μg/L,地塞米松10-7 mol/L,维生素C 50 mg/L)对其进行诱导培养.观测在体外培养条件下MSCs的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况.结果:①分离获取了较高纯度的MSCs,保持了细胞的活性;②MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈长梭形;传代培养中形态特性无明显变化,细胞增殖周期缩短,细胞均质性明显提高;③诱导后的细胞由梭形向多角形转变,Ⅱ型胶原免疫组化阳性.结论:①采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的MSCs;②MSCs在体外培养条件下能大量增殖.通过离体培养,可使体内环境下低丰度的MSCs实现数量扩增;③MSCs在特定培养液的诱导下能向软骨细胞表型转化,并能分泌软骨特异性基质,可成为软骨组织工程理想的种子细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈维平	广西医科大学组织学与胚胎学教研室	67	301	10.0	13.0