Nelin的肌动蛋白结合特性及与其相互作用蛋白质的筛选

• 作者: 冯艳 刘冬青 孟宪敏 尤昕 屈伸 曹慧青 王茵 王震 郭莲军
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 医学
• 关键词: Nelin 肌动蛋白 酵母双杂交 免疫共沉淀 细胞骨架蛋白
• 年，卷（期）: 2004,（21）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 2173-2177
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2004.21.008

摘要

为了研究人新基因nelin及其心肌表达产物Nelin蛋白的生物特性, 并寻找能够与其发生相互作用的蛋白质, 对Nelin蛋白的全长及其部分结构域进行了肌动蛋白结合共沉淀实验, 并在真核细胞内进行了免疫荧光共定位实验. 结果发现, 在体外共沉淀和细胞内共定位实验中Nelin均表现出同肌动蛋白相结合的能力. 进一步采用酵母双杂交的方法将Nelin与人心脏cDNA文库进行杂交筛选, 得到了3个阳性克隆分别为细丝蛋白(Filamin)C亚型、肌联蛋白(Titin)N2B亚型和α胰蛋白酶抑制物重链前体 (ITIH). 通过免疫共沉淀实验, 验证了Nelin能够同Filamin的羧基末端免疫球蛋白样结构发生相互作用. 通过上述实验证明了Nelin为一个新的肌动蛋白结合蛋白, 并且能够同Filamin相结合. 由此推论新基因nelin的心肌表达产物Nelin是一个细胞骨架相关蛋白并且很可能作为一个膜-细胞骨架连接蛋白, 起到了参与细胞黏着斑形成的过程.