慢性乙型肝炎患者外周血单个核淋巴细胞不同洗涤方法对HBV DNA检测的影响

• 作者: 于晓辉 刘丽 刘隽 吴雄志 方清 王丽春 许倩 赵连三
• 来源期刊: 华西医学
• 学科: 医学
• 关键词: HBVDNA 外周血单个核淋巴细胞 PCR
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 272-272
• 页数: 1页
• 分类号: R446.11+3
• 字数: 1754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-0179.2004.02.067

摘要

目的:慢性乙型肝炎患者外周血单个核淋巴细胞(Peipberal blood mononuclear cells,PBMC)不同洗涤方法对HBVDNA检测的影响.方法:淋巴细胞分离液常规密度梯度法分离1例血清HBVDNA阳性慢性乙型肝炎患者PBMC后,分别采用常规洗涤法和改良洗涤法(后者即在常规洗涤法的基础上第2、4次洗涤前不重悬细胞,直接加入洗液后离心),计算细胞收获得率和细胞存活率,荧光定量PCR法检测1、3、5次洗液样本和细胞样本的HBVDNA,重复实验3次.结果:常规法第1、3、5次洗液样本HBVDNA均阳性,改良法洗涤5次后洗液样本HBVDNA均阴性;改良法洗涤的细胞得率和细胞存活率分别为95%和98%,常规法洗涤的细胞得率和细胞存活率分别为71%和83%;不论常规洗涤法和改良洗涤法收获的PBMC均可检出HBVDNA.结论:慢性乙型肝炎患者PBMC改良洗涤法优于常规洗涤法,适用于PBMC中HBVDNA荧光定量PCR检测.