血管紧张素Ⅱ通过p38丝裂原蛋白激酶信号通路诱导巨噬细胞骨调素基因的上调表达

• 作者: 余学清 娄宁 李晓艳 祝胜郎 董秀清 郑勋华
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素Ⅱ 有丝分裂素激活蛋白激酶激酶类 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2004,（15）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 1283-1287
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4496字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0376-2491.2004.15.014

摘要

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激巨噬细胞骨调素(OPN)基因表达的模式变化,及p38丝裂原蛋白激酶(p38MAPK)信号通路在AngⅡ上调表达骨调素中的作用.方法用反转录聚合酶反应(RT-PCR)测定AngⅡ体外刺激RAW264.7细胞骨调素基因表达及p38MAPK特异抑制剂SB202190的影响;用Western印迹测定AngⅡ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞p38MAPK及其转录因子-激活转录因子2(ATF2)表达的时间模式及SB202190对AngⅡ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化表达的影响.结果(1)AngⅡ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞骨调素基因表达呈时间依赖性,3 h骨调素表达略有升高,6、12、24 h骨调素分别升高0.9、2.3及2.4倍(P＜0.01);而24 h阴性对照无明显变化,说明骨调素的表达呈诱导分泌性.(2)AngⅡ诱导RAW264.7细胞骨调素基因表达呈剂量依赖性,AngⅡ(1 μmol/L)孵育12 h即可诱导骨调素显著表达,升高2.6倍(P＜0.01).(3)SB202190(5 μmol/L)在AngⅡ(1 μmol/L)刺激前30 min加入培养基抑制作用最明显,共同孵育12 h,抑制率达到61.7%(P＜0.01);而同时和刺激后120 min加入SB202190(5 μmol/L),抑制作用不明显,抑制率分别为20.9%和20.1%.(4)不同浓度SB202190 1、5、10 μmol/L在AngⅡ(1μmol/L)刺激前30 min加入培养基,共同孵育12 h,其抑制率分别为43.4%、63.0%及65.5%(P＜0.01).(5)AngⅡ(1μmol/L)诱导RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化表达在15～30 min达到高峰;而AngⅡ(1 μmol/L)诱导RAW264.7细胞ATF2磷酸化表达在30～45 min达到高峰.(6)不同浓度SB202190 1、5 μmol/L(终浓度)在AngⅡ(终浓度1 μmol/L)刺激前30 min加入培养基,共同孵育30min,结果表明,随着浓度的升高,对RAW264.7细胞p38MAPK磷酸化表达的抑制作用呈剂量依赖性,5 μmol/L SB202190抑制率为61.7%(P＜0.01).结论AngⅡ可通过激活p38MAPK信号通路诱导巨噬细胞RAW264.7骨调素基因上调表达.