猕猴胚胎干细胞的分离培养和鉴定

• 作者: 季维智 郑萍 马岚
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 胚胎干细胞 内细胞团 囊胚 鼠胚成纤维细胞 猕猴
• 年，卷（期）: 2004,（15）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1346-1349
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2|R446.5
• 字数: 3995字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.15.007

摘要

目的从体外培养成熟囊胚中分离并鉴定猕猴胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES cell).方法猕猴卵母细胞经体外成熟培养、体外受精和早期胚胎体外成熟培养后,获得猕猴囊胚.当囊胚由透明带自然孵出后,用细玻璃针剥离囊胚中的内细胞团(inner cell mass,ICM)并与饲养细胞进行共培养.由ICM分离,培养并鉴定胚胎干细胞集落.结果由4只FSH超排猕猴中共取得92个处于GV期的猕猴卵母细胞,选取其中的22个用HECM-10培养基培养后,获得6个高质量的囊胚,由此6个囊胚中分离得到3个内细胞团,并由此最终获得1株猕猴ES细胞,即RS5细胞.RS5细胞具高比例核/质比,核仁多,其细胞集落边缘平整,其内各单个细胞清晰.经约5个月的连续传代后,仍保持了正常二倍体的核型,其染色体数目为42条.碱性磷酸酶细胞组织化学染色为阳性,说明RS5细胞为未分化态的胚胎干细胞.经高密度和长时间培养后,RS5细胞可进一步分化为多种类型细胞.结论 RS5细胞株具有自我更新能力和多分化潜能,属于胚胎干细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑萍	中国科学院昆明动物研究所动物生殖生物学重点实验室	23	119	6.0	10.0
2	季维智	中国科学院昆明动物研究所动物生殖生物学重点实验室	29	274	9.0	15.0
3	马岚	中国科学院昆明动物研究所动物生殖生物学重点实验室	3	6	1.0	2.0