兔骨髓源性神经干细胞分化为成熟神经元样细胞的特征研究

• 作者: 丁涟沭 姜晓丹 徐如祥 徐强 蔡颖谦 邹雨汐 陈剑荣
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 神经系统/细胞学 干细胞 5-羟色胺 骨髓细胞 色谱法 高压液相
• 年，卷（期）: 2004,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3042-3043
• 页数: 3页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3671字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2004.16.022

摘要

目的:探讨兔骨髓源性神经干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)经体外培养及诱导分化成的神经元样细胞,能否合成分泌5-羟色胺神经生物活性物质成分.方法:分离兔BMSCs,应用神经干细胞培养液和分化诱导因子进行体外培养和诱导分化,免疫细胞化学鉴定;并应用高效液相色谱法(HPLC)检测其5-羟色胺生物活性物质的含量.细胞培养所涉及的细胞因子主要有脑源性神经营养因子(BDNF)和维A酸.结果:BMSCs培养12 d可见大而圆细胞,免疫细胞化学鉴定Nestin抗原阳性;培养20 d可见长突起神经元样细胞,神经核蛋白(NeuN)免疫细胞化学检查阳性,高效液相检测BMSCs、空白神经干细胞培养液及L-02肝细胞阴性对照组未测到5-羟色胺生物活性物质,经体外培养增殖14 d的神经干细胞及培养液、体外诱导分化20 d的神经元样细胞及培养液则可检测到5-羟色胺分别为:每1×107细胞中(1.794 0±0.009 5),(4.010±0.117 0)μg/L,差异有非常显著性意义(t=30.632 3,P=0.001).方差分析显示:随着骨髓基质细胞培养天数的增加,其所含的5-羟色胺浓度也渐增加,组间5-羟色胺含量差异有显著意义(P＜0.01).结论:兔BMSCs能在体外增殖,并表达Nestin抗原;而且,在适宜条件下能分化成神经元样细胞,并表达成熟神经元特异性核蛋白,合成、分泌5-羟色胺神经递质.