U6启动子引导双链RNA特异性抑制骨保护素配体的表达

• 作者: 戴先文 李明全 李靖 王全平 胡蕴玉 雷伟 韩利华
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨疾病 配体 RNA 骨基质 细胞
• 年，卷（期）: 2004,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2621-2623
• 页数: 3页
• 分类号: R318
• 字数: 5152字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2004.14.012

摘要

目的:构建能生成与骨保护素配体(osteoprotegerinligand,OPGL)同源的发卡结构小双链RNA的载体并验证其对OPGL mRNA的抑制效应.方法:根据大鼠的OPGL的基因序列,参考OPGL mRNA的空间结构,设计发卡结构小干预RNA(short-interfering RNA,siRNA)模版,并构建由U6启动子引导产生siRNA的质粒载体.转染大鼠骨髓基质细胞,48 h后提取细胞总RNA,Northern blot,以OPGL与内参β-actin自显影产物的灰度比值来反映OPGL mRNA的表达情况,结果进行统计学分析.结果:成功获得U6启动子引导产生siRNA的质粒载体,转染骨髓基质细胞后细胞中OPGL mRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少.结论:U6启动子引导产生siRNA的质粒载体能有效的减低OPGL mRNA的表达量从而抑制OPGL的表达.